3'-唾液乳糖鈉鹽制備方法是什么


3'-唾液乳糖鈉鹽(3'-Sialyllactose Sodium Salt)的制備方法主要包括化學(xué)合成法和生物合成法(酶催化反應(yīng)與微生物發(fā)酵),以下是對這兩種方法的詳細(xì)介紹:
化學(xué)合成法
常用方法:2-酮-3-脫氧-D-甘油-D-半乳糖-壬壬酸(KDN)與氰硼氫化na的還原胺化反應(yīng)。
其他方法:還包括水解含唾液酸的糖綴合物、N-乙酰-D-甘露胺轉(zhuǎn)化為3'-唾液乳糖鈉鹽,以及水解唾液酸-tn抗原等。
生物合成法
酶催化反應(yīng)
原理:利用特定的酶(如α2,3-唾液酸轉(zhuǎn)移酶)將唾液酸轉(zhuǎn)移到乳糖上,形成3'-唾液乳糖鈉鹽。
過程:
準(zhǔn)備乳糖和唾液酸(通常是N-乙酰神經(jīng)氨酸,Neu5Ac)作為底物。
在適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件下(如pH、溫度、離子強(qiáng)度等),加入α2,3-唾液酸轉(zhuǎn)移酶催化反應(yīng)。
反應(yīng)完成后,通過純化步驟獲得高純度的3'-唾液乳糖鈉鹽。
微生物發(fā)酵
原理:通過基因工程技術(shù)構(gòu)建能夠合成3'-唾液乳糖鈉鹽的微生物細(xì)胞工廠。
過程:
選擇合適的宿主微生物(如大腸桿菌、枯草芽孢桿菌等)。
通過基因工程技術(shù)將編碼α2,3-唾液酸轉(zhuǎn)移酶和其他相關(guān)酶的基因?qū)胨拗魑⑸镏小?/p>
在含有乳糖和唾液酸前體(如CMP-Neu5Ac)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)這些工程微生物。
通過發(fā)酵過程合成3'-唾液乳糖鈉鹽,并通過純化步驟獲得高純度的產(chǎn)品。
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