6’-Sialyllactose的制備方法有哪些


6’-Sialyllactose(6'-唾液酸乳糖)的制備方法主要包括化學合成法和生物合成法(酶催化反應與微生物發酵),以下是具體介紹:
化學合成法
原理:以唾液酸和乳糖為起始原料,在特定的反應條件下通過糖苷鍵的形成反應合成6’-Sialyllactose。
過程:通常涉及保護基策略,以逐步構建糖苷鍵。這種方法需要高純度的唾液酸和乳糖原料,且反應條件較為苛刻,可能涉及強酸、強堿等條件,但收率可能較低且難以實現工業化生產。
生物合成法
酶催化反應
原理:利用特定的糖基轉移酶(如α2,6-唾液酸轉移酶)將唾液酸轉移到乳糖上,形成6’-Sialyllactose。
過程:通過基因工程技術將編碼糖基轉移酶的基因導入宿主細胞(如大腸桿菌、枯草芽孢桿菌等),使宿主細胞能夠表達并分泌這些酶。然后,在含有乳糖和唾液酸的培養基中培養這些宿主細胞,通過酶催化反應合成6’-Sialyllactose。
微生物發酵
原理:通過基因工程技術構建能夠從頭合成6’-Sialyllactose的微生物細胞工廠。
過程:例如,有研究通過改造枯草芽孢桿菌,引入來源于腦膜炎奈瑟菌的NeuC、NeuB、NeuA以及來源于發光桿菌屬希帕菌JT-ISH-224的α2,6-唾液酸轉移酶,成功構建了6’-Sialyllactose的從頭合成途徑。通過微調啟動子強度、敲除競爭抑制途徑基因以及對前體合成基因拷貝數進行優化,進一步提高了6’-Sialyllactose的產量。
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