N-乙酰神經(jīng)氨酸的制備方法有哪些


一、微生物發(fā)酵法(主流工業(yè)化方法)
大腸桿菌發(fā)酵法
工藝流程:以食品級葡萄糖和玉米漿為原料,經(jīng)大腸埃希氏菌(菌株號SA-8)發(fā)酵、過濾、滅菌、水解、提純等步驟制成。
枯草芽孢桿菌基因工程法
工藝特點:利用基因工程改造的枯草芽孢桿菌工程菌株發(fā)酵,產(chǎn)量達9.7g/L(3L發(fā)酵罐)。
二、化學合成法
傳統(tǒng)化學合成
工藝流程:通過多步化學反應合成NANA,但需繁瑣的基團保護與去保護操作,且易產(chǎn)生手性異構副產(chǎn)物。
微波水解法
工藝流程:以聚唾液酸為原料,用硫酸和磷酸混合酸液在微波反應器中水解(如70℃、24min),經(jīng)超濾、蒸發(fā)結晶等步驟得到NANA。
三、酶催化轉(zhuǎn)化法
全細胞生物催化
工藝流程:利用重組大腸桿菌表達N-乙酰葡萄糖胺-2-表異構酶等,將N-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸轉(zhuǎn)化為NANA。
“一釜五酶法"
工藝創(chuàng)新:以氨基葡萄糖為起始底物,通過五種酶催化合成唾液酸及其類似物,延伸了生物全酶法生產(chǎn)通路。
四、天然產(chǎn)物提取法
雞蛋殼膜提取
工藝流程:以雞蛋殼膜為原料,用硫酸水解(0.05mol/L、80℃、2h),經(jīng)乙醇沉淀、離子交換層析純化得到NANA。
燕窩提取
工藝特點:燕窩中NANA含量豐富,但組分復雜,提取需結合酸、堿或酶法。
五、其他創(chuàng)新方法
聚唾液酸發(fā)酵水解法
工藝流程:通過發(fā)酵生產(chǎn)聚唾液酸,再經(jīng)水解得到NANA。
結晶純化法
工藝特點:通過溶解、調(diào)節(jié)pH、降溫結晶、過濾洗滌等步驟(如重復兩次結晶),可得到純度>99%的NANA標準物質(zhì)。
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