透明質酸-活性酯的制備方法主要有以下幾種：

化學合成法

• 酯化反應：透明質酸的酯化改性包括羥基改性和羧基改性，即透明質酸結構中的羥基與酸或酸酐類物質發生酯化反應，或羧基與醇、酚、環氧類物質或鹵代烴反應，形成酯化衍生物。例如，將透明質酸鈉在陽離子交換樹脂中滲透成酸，加入四丁基氫氧化銨至中性，冷凍干燥后取透明質酸，溶于無水二甲基亞砜，加入對氯甲基*乙烯，反應得到酯類化合物。

• 活性酯法：利用活性酯試劑與透明質酸進行反應。例如，將透明質酸溶于適當的溶劑中，加入N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）和1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（EDC）等活性酯試劑，在一定條件下反應，使透明質酸的羧基與活性酯試劑結合，形成透明質酸-活性酯。

生物合成法

通過微生物發酵法制備透明質酸，再對發酵得到的透明質酸進行化學修飾制備活性酯。例如，利用獸疫鏈球菌等微生物發酵生產透明質酸，然后采用上述化學合成法中的酯化反應或活性酯法對發酵得到的透明質酸進行進一步修飾，制備透明質酸-活性酯。

物理共混法

將透明質酸與含有活性酯基團的聚合物或小分子化合物進行物理共混，通過分子間的相互作用形成透明質酸-活性酯復合物。例如，將透明質酸與含有活性酯基團的聚乳酸等聚合物在適當的溶劑中混合，通過溶劑揮發或其他物理方法使兩者結合在一起。

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