肝素-炔基的制備方法主要有以下幾種：

點擊化學法

• 原理：利用炔基與疊氮基團之間的點擊化學反應，將炔基引入肝素分子中。

• 步驟：

• 制備端疊氮基肝素：將肝素鈉和疊氮丙胺溶解于pH為5.6的醋酸鹽緩沖溶液中，加入催化劑氰基*氫化鈉，在55～65℃下攪拌反應7～8天，透析純化后得到端疊氮基肝素。

• 制備α-炔基聚（Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸）：先將Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸與三聚光氣反應生成環內酸酐，再與炔丙胺在無水N，N-二甲基甲酰胺中室溫反應3天，得到α-炔基聚（Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸）。

• 點擊反應：將上述兩種產物溶解于二甲基亞砜中，通入氬氣，加入五水硫酸銅和抗壞血酸鈉，在50～60℃下油浴反應2～3天，透析純化后得到肝素-炔基。

化學修飾法

• 原理：通過化學試劑對肝素分子進行修飾，引入炔基官能團。

• 步驟：將肝素溶解在適當的溶劑中，加入含有炔基的化學修飾劑，在一定的反應條件下進行反應，反應結束后進行純化處理，得到肝素-炔基。

利用活化炔基試劑法

• 原理：選擇合適的活化炔基試劑，如N-炔丙基馬來酰亞胺等，使其與肝素分子上的特定基團發生反應。

• 步驟：將活化炔基試劑溶解在有機溶劑中，將肝素溶解在緩沖溶液中，調節pH值后，在攪拌下緩慢滴加活化炔基試劑溶液，控制反應溫度和時間，反應結束后通過透析、超濾或凝膠過濾層析等方法去除未反應的試劑和雜質，得到肝素-炔基。

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