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BSA-Alkyne的制備過程是怎樣的

2025-03-02 [46]

以下是一種常見的BSA-Alkyne的制備過程:

活化炔基試劑

選擇合適的炔基試劑,如N-炔丙基馬來酰亞胺(MV 130.12)等,將其溶解在有機溶劑(如二甲基亞砜,DMSO)中,配制成一定濃度的溶液。

修飾牛血清白蛋白(BSA)

將牛血清白蛋白(BSA)溶解在緩沖溶液(如磷酸鹽緩沖液,PBS)中,調節pH值至合適范圍(一般為7.0-8.0)。然后,在攪拌下緩慢滴加活化的炔基試劑溶液,控制反應溫度(一般為室溫或4°C)和反應時間(數小時至過夜),使炔基與BSA上的特定基團(如半胱氨酸殘基)發生反應。

純化產物

反應結束后,通過透析、超濾或凝膠過濾層析等方法去除未反應的炔基試劑和其他小分子雜質,得到純化的BSA-Alkyne產物。

鑒定與分析

采用多種技術對制備的BSA-Alkyne進行鑒定和分析,如SDS-PAGE電泳檢測其分子量和純度,Western blot驗證炔基的修飾情況,以及光譜分析(如紫外-可見光譜、熒光光譜)等確定其結構和性質。

儲存

將純化后的BSA-Alkyne產物分裝,儲存在-20°C或更低溫度下,避免反復凍融,以保持其穩定性。

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